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  • 產品名稱:比色法定量檢測試劑盒

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簡單介紹:
比色法定量檢測試劑盒介紹: 細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3 ,4 ,5-三磷酸(PIP3),在PTEN去磷酸化后,釋放出游離磷酸根,與孔雀綠染料發生顯色反應后,采用比色法測定其峰值的變化,以此進行測算單位酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細胞裂解懸液樣品的PTEN活性及其抑制劑的檢測。廣泛應用于細胞凋亡、蛋白組學、病理生理學、神經病變等研究。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。
詳情介紹:

比色法定量檢測試劑盒介紹:

細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3 ,4 ,5-三磷酸PIP3),PTEN去磷酸化后,釋放出游離磷酸根,與孔雀綠染料發生顯色反應后,采用比色法測定其峰值的變化,以此進行測算單位酶活性的權威而經典的技術方法。該技經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細胞裂解懸液樣品PTEN活性及其抑制劑的檢測。廣泛應用于細胞凋亡、蛋白組學、病理生理學、神經病變等研究。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。

比色法定量檢測試劑盒樣品準備

    1. 準備好75cm2細胞培養瓶或100mm細胞培養皿的待測培養細胞(5 X 107細胞)

    2. 小心加入3毫升預冷的清理液(Reagent A,覆蓋生長表面

    3. 小心抽去清理液

    4. 使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞 

    5. 加入3毫升清理液(Reagent A,混勻細胞

    6. 移入到預冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細胞從這一步驟開始

    7. 放進4℃臺式離心機離心5分鐘,速度為300g

    8. 小心抽去上清液

    9. 加入200至500微升裂解液(Reagent B,充分混勻

    10. 轉移到預冷的1.5毫升離心管

    11. 強力渦旋震蕩15

    12. 置于冰槽里孵育30分鐘

    13. 放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf 5415

    14. 小心移取500微升上清液到新的預冷的1.5毫升離心管

    15. 移取2微升進行蛋白定量測定(注意:建議使用 Bradford 蛋白質濃度定量試劑盒-GMS30030.1

    16. 即刻放進-70℃保存或置于冰槽里繼續后續操作

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